Part 1 概論
實驗1 緒 論Introduction
一、目的
認識並了解實驗室常用的各種器械及顯微鏡的使用方法。
二、提示
生理學是一門生動有趣的科學,能使學生對身體產生的各種反應得到答案。在學習生理學實驗的過程,應秉持著積極研究的精神,以探索其答案,將可從實驗的過程中發現生理學的奧祕。在保育動物的觀念下,每位同學應珍惜每隻動物的犧牲,充分運用動物的器官功能與生理反應。
書寫生理學實驗報告應包括以下幾項大綱:
1.前言(introduction):書寫內容主要包括此實驗的目的及重要原理。
2.結果(results):實驗結果可以表格方式整理或繪圖加以說明。
3.討論(discussion):將結果配合學理加以分析,亦可參考書中所列各項問題加以說明。
4.結論(conclusion):總結報告各項內容,詞句必須簡明扼要。對於實驗室的各種器械,必須知道其名稱及操作方式,尤其對顯微鏡等貴重儀器,學員必須先了解正確使用方法,才可順利操作實驗及避免損壞。
三、材料
1.有齒鑷子(tissue forceps)
2.無齒鑷子(dressing forceps)
3.組織剪(surgical scissors)
4.擴張器(dilator)
5.滴管(dropper)
6.骨鉗(bone cutting forceps)
7.探針(probe)
8.止血鉗(mosquito hemostatic forceps)
9.解剖刀及刀柄(blade and scalpel handle)
10.微量吸管(micropipet)
11.黃色吸頭(yellow tip):200 μ
12.藍色吸頭(blue tip):1000 μ
13.叩診鎚(hammer)
14.敲診鎚(hammer)
15.光學顯微鏡(microscope)
四、步驟
(一)器械
部分實驗室器械如下:
1.有齒鑷子:用於動物的皮膚、毛髮及肌肉等組織,可固定而避免滑動。
2.無齒鑷子:用於動物的腦組織及內臟器官,可避免組織受損。
3.組織剪:一端為鈍端可避免組織受損,一端為尖端可用於細小組織。
4.擴胸器:用於打開胸腔及固定。
5.骨鉗:可撥開腦殼。
6.探針:青蛙麻醉用。
7.止血鉗:用於夾閉血管或固定組織,亦可用於裝卸解剖刀。
8.微量吸管:用於吸取微量液體,如配藥時使用。
(二)光學顯微鏡使用方法
1.光學顯微鏡放置於離桌緣至少5公分位置,注意應以雙手拿取,一手握住鏡臂,另一手托住底座以避免震盪。
2.將電源插上並開啟光源。
3.檢查接目鏡及接物鏡是否髒汙,以拭鏡紙擦拭。
4.將載玻片放置於載物台上並夾好,以粗細調節輪調至適當位置。
5.調整兩眼瞳距與接目鏡焦距,兩眼須同時睜開,近視同學的眼鏡戴著或取下皆可。
6.接物鏡主要包括10X、40X及100X三種,使用原則為由低倍至高倍,若觀察組織切片或血球計數時,可先用10X(乘上接目鏡10倍即可放大100倍)的接物鏡,調整粗調節輪到切片影像出現,此時亦可調節光源大小,然後再將接物鏡調至40X(放大400倍),再以細調節輪調至影像清晰為止。
7.在鏡台圓孔正下方有聚光器(condenser),用以聚集及調節光線,而附於聚光器的下方有虹膜光圈(diaphragm),可藉其調節桿來調節光圈開啟的大小,配合光源的量,可決定透過聚光器而打在玻片背面的光線強弱;過亮時常因缺乏明暗對比而使標本模糊不清,此時可將虹膜光圈關小,以利於檢視。
8.觀察時切忌將粗調節輪快速上升或下降,以避免壓碎玻片。
9.若欲使用100X物鏡(放大1000倍)時,需先將接物鏡轉移,滴一滴油在適當位置(以油為中間介質,可使觀察更清晰),再小心的將物鏡旋轉接觸到玻片上。高倍鏡頭與玻片距離很近,調整焦距時,須特別注意避免鏡頭觸及玻片標本,使其破裂。
10.使用油鏡(放大1000倍)時,必須以細調節輪慢慢找尋,若仍無法找到,則應重新換回40X接物鏡,找到目標物後再重複使用高倍油鏡。
11.油鏡使用後,必須以沾有二甲苯的拭鏡紙擦拭數次後,再以乾淨的拭鏡紙重複擦拭,切忌使用酒精。
12.顯微鏡使用後必須轉到10X接物鏡,並將鏡台降到最低,關掉燈源,纏好電線,套上膠套,放入乾燥箱中。
(三)動物固定方法
1.大白鼠(SD rat):
2.青蛙。
五、結果
1.認識並明瞭各種器械及顯微鏡各部構造之名稱與功能。
2.每人均實際操作一次,發掘問題並與同學及老師討論。
六、討論
1.接物鏡上的10X、40X、100X各代表什麼意義?
2.光學顯微鏡的保養方法有哪些?
3.顯微鏡油鏡使用油的理由與目的為何?使用後如何清理?
4.說明顯微鏡的聚光器及虹膜光圈的功能及使用時機。
5.由此實驗你獲得什麼知識及感想?