汪炳華

科學日新月異，生物化學的知識也一日千里，然最基本的實驗技術皆是萬變不離其宗，只要掌握生化實驗技術的精髓，無論何種實驗都可輕鬆上手。本書涵蓋基礎化學實驗、臨床生物化學實驗，以及發展神速的分子生物化學實驗，是入門者奠定基礎的初學教本，也可作為複習者溫故知新不可或缺的參考書。其中各項實驗之目的與原理、試劑的配置，以及實驗步驟與結果之鋪陳，都足以作為教師授課必備的參考教材。

隨著科學之日新月異，生化學上的知識更是一日千里。「醫學生物化學實驗技術」此書綜合了基礎化學實驗、臨床生物化學實驗及發展神速的分子生物化學實驗。此書不算新異，但就基本的生化臨床生化及分生實驗而言，是初學者奠定基礎的良好教本，也是已學者溫故知新不可或缺的教科書，就每一實驗之目的、原理、試劑的配置、實驗步驟及結果之鋪陳，更是教學者之良伴。
筆者擔任臨床生物化學教學十多年，終於見到一本屬於實驗課程之教科書，內心雀躍不已。翻譯此書期間，適逢個人進修博士學位，繁忙的日子常讓我忘記此書在我手中，感謝合記圖書出版社金明芬小姐不斷的督促及幫忙，經校稿多次才譯完此書，內容盡量以通順、口語化但專業為主，故專有名詞則盡量附上其原文，使不失原著之本意，若仍有錯誤及不妥之處，煩請讀者及先賢達不吝指正。
學習就像一場漫長之馬拉松，即使科學日新月異，計畫永遠趕不上變化，「溫故才能知新」，一本有內涵之好書，絕對值得您品嘗、開啟您潛藏之新知，敬邀您共同參與。

第一章　吸收光譜法 1
　第一節　吸收光譜 .....................................1
　第二節　光吸收的基本定律─Lamber-Beer定律 .....................................6
　第三節　分光光度計簡介 .......................11
　第四節　吸收光譜法的應用 ...................16
　　實驗 1　血紅素和氧合血紅素吸收光譜的測定 ............................................................21
　　實驗 2　血液葡萄糖測定（鄰甲苯胺法）......22
　　實驗 3　蛋白質含量的測定 ...........................26
　　實驗 4　血清膽固醇的測定（氯化鐵法）......33
　　實驗 5　RNA含量的測定 ..............................35
　　實驗 6　DNA含量的測定 ..............................38
　　實驗 7　血清過氧化脂質的測定 ...................41

第二章　電泳技術 45
第一節　電泳的基本原理 .......................45
　第二節　影響電泳速度的因素 ...............47
　第三節　常用的電泳支持介質 ...............50
　第四節　電泳後的染色 ...........................55
　　實驗 8　血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳 .......58
　　實驗 9　血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳 ...........61
　　實驗10 血清蛋白聚丙烯胺凝膠電泳 .......64
　　實驗 11 SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳測定蛋白質的分子量 .....................................70
　　實驗 12 聚丙烯醯胺梯度凝膠電泳測定蛋白質的分子量 ...........................................75
　　實驗 13 等電聚焦電泳測定蛋白質的等電點 ............................................................80
　　實驗 14 血清載脂蛋白Ｂ的免疫定量測定（單向火箭免疫電泳法）........................84

第三章　層析法 87
第一節　概述 ...........................................87
　第二節　吸附層析 ...................................89
　第三節　分配層析 ...................................93
　第四節　離子交換層析 ...........................95
　第五節　凝膠層析 ...................................98
　第六節　親和層析 .................................104
　　實驗 15 胺基酸的紙層析 .............................107
　　實驗 16 糖的薄層層析 .................................110
　　實驗 17 凝膠層析分離血紅素與魚精蛋白 ..........................................................112
　　實驗 18 離子交換層析分離混合胺基酸 ..........................................................114
　　實驗 19 親和層析法分離人血漿纖溶原
　　　　　　 ........................................................117
　　實驗 20 血漿免疫球蛋白IgG的分離純化與鑑定 .....................................................121

第四章　酵素學分析 129
第一節　酵素的分離純化 .....................129
　第二節　酵素的活性測定 .....................131
　第三節　酵素動力學 .............................133
　第四節　酵素分析法 .............................136
　第五節　同功 .....................................140
　第六節　酵素在醫學上的應用 .............140
　　實驗 21 血清-丙胺轉胺(ALT)活性的測定（改良Mohun法）...........................142
　　實驗 22 血清乳酸脫氫活性的測定 ........148
　　實驗 23 受質濃度對酵素活性的影響──鹹性磷酸Km值的測定 .......................152
　　實驗 24 酵素法測定血清膽固醇含量 .........155
　　實驗 25 酵素法測定血液葡萄糖含量 .........157
　　實驗 26 血清乳酸脫氫同功測定──瓊脂糖凝膠電泳法 .................................160

第五章　分子生物學實驗基本技術 163
第一節　核酸分離萃取的原則 .............163
　第二節　核酸分離萃取的基本方法 .....164
　第三節　核酸的鑑定 .............................168
　第四節　限制性核酸內切及其應用 ..172
　　實驗 27 周邊血白血球DNA的萃取（Nal法）..................................................174
　　實驗 28 真核基因組DNA的分離純化 ..........................................................176
　　實驗 29 DNA的瓊脂糖凝膠電泳.................178
　　實驗 30 質粒DNA的小量快速製備（鹹變性裂解法）..........................................180
　　實驗 31 質粒DNA的限制性內切消化解 ..........................................................183
　　實驗 32 真核組織RNA的製備 .................185
　　附錄一 生物化學實驗守則 .........................188
　　附錄二 玻璃儀器的洗滌與乾燥 .................189
　　附錄三 生化實驗樣品的製備 .....................191
　　附錄四 試劑的分級、配製與保存 .............193
　　附錄五 常用緩衝液的配製方法 .................196
　　附錄六 易變質及特殊試劑的保存方法 .....204
　　附錄七 一些常用蛋白質分子量參考值 .....205
　　附錄八 一些常用蛋白質等電點參考值 .....206